除非特殊说明,在所有情况下,所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40-60倍.
应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等,比较色谱柱性能的改善,以确定清洗的效果.
确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液,清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶.
应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶.
1.正相填料
用四氢呋喃冲洗.
用甲醇冲洗.
用四氢呋喃冲洗.
二氯甲烷冲洗.
用无苯正己烷冲洗.
2.反相填料
用HPLC级水冲洗,冲洗时进4等份的200l的二甲亚砜（DMSO）.
用甲醇冲洗.
用氯仿冲洗.
用甲醇冲洗.
3.阴离子交换填料
用HPLC级水冲洗.
用甲醇冲洗.
用氯仿冲洗.
4.阳离子交换填料
用HPLC级水冲洗;在冲洗的过程中进4等份200l的DMSO
四氢呋喃冲洗.
5.蛋白质凝胶过滤填料
去除蛋白质尺寸排阻介质中的污染物有两种清洗/再生的方法.
弱保留蛋白质
用30moL/LpH3.0磷酸盐缓冲液冲洗.
强保留蛋白质
用100%的水到100%的乙腈梯度洗脱60min.
6.多孔石墨化碳
多孔石墨碳有四种再生的方法,选用哪一种方法依赖于被分析物和所用的溶剂.
酸碱再生
适合于使用极性流动相分析离子类分析物.
将色谱柱倒装
用50ml含0.1%三氟乙酸的四氢呋喃/水（1:1）溶液1ml/min流速冲冼.
用50ml含0.1%三乙胺或氢氧化钠的四氢呋喃/水（1:1）溶液1ml/min流速冲冼.
用50ml含0.1%三氟乙酸的四氢呋喃/水（1:1）溶液1ml/min流速冲冼.
用95%甲醇水溶液冲洗重新平衡.
将色谱柱改为正向.
作者:英国的R.Plumb-Glaxo
强有机溶剂再生
适合于水相分析极性或离子类分析物.
用50ml丙酮以1ml/min流速冲洗.
用120ml二丁醚以1ml/min流速冲洗.
用50ml丙酮以1ml/min流速冲洗.
用水冲冼至平衡.
正相再生
适合于主要使用正相流动相的多孔石墨化碳柱.
用50ml二氯甲烷以1ml/min流速冲洗.
用50ml甲醇以1ml/min流速冲洗.
用50ml水以1ml/min流速冲洗.
用50ml0.1mol/L盐酸以1ml/min流速冲洗.
用50ml水以流速1ml/min冲洗.
用50ml甲醇以1ml/min流速冲洗.
用50ml二氯甲烷以1ml/min流速冲洗.
用流动相冲冼至平衡.
三氟乙酸的去除
适合于流动相中含有三氟乙酸的多孔石墨化碳柱.
用加热到75℃的乙腈冲洗,同时色谱柱也要保持在这一温度.
7. 带金属抗衡离子的聚合物填料
基质是带金属抗衡离子的聚合物色谱柱,有三种再生方法,每种方法详细列于下表:
色谱柱类型 金属污染物 有机污染物 色谱柱清冼
氢离子型用25℃的0.1mol/L的H2SO4溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4—16小时用25℃的20:80的乙腈
水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时用65℃的20:80的你ACN:0.01NH2SO4溶液
以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时
钙离子型用25℃的0.1mol/LpH6.3的Ca（NO3）2溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4—16小时用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时钠离子型用85℃的0.1mol/L 的NaNO3溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4—16小时
用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反相冲冼4小时用25℃的20:80的乙腈
水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时银离子型没有再生过程的报导. 用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时铅离子型用85℃的pH5.3的0.1MPb（NO3）2溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4—16小时用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时用25℃的20:80的乙腈水溶液以0.1ml/min的流速反向冲冼4小时